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HybriDetect試紙條檢測DNA 和RNA的特異性-技術

發(fā)布時間: 2020-06-12  點擊次數(shù): 2371次

用CRISPR/Cas12或Cas13新技術檢測DNA或RNA序列的特異性,通過酶識別一個特定的目標序列,與該序列結合后,其核酸內(nèi)切酶活性被激活,并切割任何報告序列。該項技術可以很容易地與側流雜交檢測試紙條相結合,以顯示結果。

SHERLOCK

用CRISPR核酸酶進行核酸檢測,博德研究所(Broad Institute)的研究人員近發(fā)表了一篇關于基于CRISPR的診斷平臺的文章,該平臺將核酸預擴增與CRISPR-Cas酶學相結合,用于特定識別所需的DNA或RNA序列。所述技術稱為SHERLOCK(specific high-sensitivity enzymatic reporter unlocking特異性高靈敏度酶報告解鎖)方法。這種方法可以很容易地與側流雜交檢測試紙條相結合,以快速顯示結果。CRISPR/Cas酶Cas12或Cas13通過與特定靶點結合而被激活。當被激活時,內(nèi)切酶能夠切割非特異性的報告物。一個簡單的、無儀器和便攜式的LFA(lateral flow assay側流分析)雜交檢測試紙條方法讀出SHERLOCK結果。

SARS-CoV-2 檢測

布勞頓(Broughton et al.)等人開發(fā)了一種與CRISPR-Cas12相關的檢測方法,用于在30分鐘內(nèi)從患者RNA中檢測SARS-CoV-2,稱為DETECTR。

上游反轉錄(RT)與環(huán)介導等溫擴增(LAMP)同時進行(RT-LAMP)。之后,進行Cas12特異性病毒序列檢測和報告分子的裂解。后一步是通過我們的側流雜交試紙條檢測進行可視化。它的主要優(yōu)點是不需要任何儀器就能顯示出快速的結果。

默瑞生物

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